Подсчет клеток на фиксированных окрашенных мазках (метод Виноградского-Брида)

Метод широко используется для определения численности микроорганизмов в различных естественных субстратах – почве, загрязненных водах, молоке и т.п. [13]. Хорошо обезжиренное предметное стекло помещают на миллиметровую бумагу, на которой отмечен прямоугольник площадью 1 см2. Затем на стекло из микропипетки наносят точно измеренный объем исследуемой суспензии (в нашем случае – почвенная суспензия в разведении 10-3). Нанесенную суспензию равномерно распределяют петлей на отмеченном 1 см2, препарат подсушивают на воздухе, фиксируют в пламени горелки и окрашивают. Количество клеток подсчитывают с иммерсионным объективом в квадратах окулярной сетки. Количество клеток микроорганизмов, содержащихся в 1 мл исследуемого субстрата, вычисляют по формуле:

М= (aS/sV)´n,

где М – количество клеток в 1 мл исследуемого субстрата, а – среднее число клеток в квадрате окулярной сетки, s – площадь квадрата окулярной сетки (мкм2), V – объем нанесенной на стекло суспензии в мл, S – площадь приготовленного мазка (мкм2), n – разведение исследуемого субстрата. Метод Виноградского-Брида использовали для подсчета общей численности бактерий в почве[4].

Популярные статьи:

Биология как наука о живом
Нынешняя биология – прикладная физика, хотя ученые являются, несомненно, живыми людьми. Четыре Откровения указывают путь построения биологии как общения живых людей с разнообразными другими проявлениями жизни. При этом материя и разного р ...

Размножение
Беременность продолжается 62–65 дней. Матерые волчицы в среднем щенятся раньше, чем молодые. Самые ранние щенения отмечены в начале января, а самые поздние – в июле, но это – резкие отклонения от обычных сроков. Средний размер выводка – ...

Влияние холода на растения и приспособления к нему
О пределе холода, который способны вынести растения в естественных условиях, дают представление величины предельно низких температур на земном шаре. Там, где зарегистрирована самая низкая температура (—90°С, станция «Восток» в Антарктиде) ...